AEEA-AEEA Hydrophilic Linker

การรวมตัวของ ADC และการกวาดล้างอย่างรวดเร็วเป็นอุปสรรคสำคัญที่ทำให้เกิดภูมิคุ้มกันในระดับสูง ประสิทธิภาพต่ำ และความล้มเหลวของแบทช์ การแนะนำตัวเชื่อมโยงที่ชอบน้ำ (ที่มีหน่วย PEG เช่น AEEA-AEEA) เป็นกลยุทธ์ที่มีประสิทธิผลในการแก้ไขปัญหาทั้งสองนี้
The mechanism for reducing aggregation: The driving force for ADC aggregation is mainly the mutual attraction between hydrophobic drug molecules. When DAR>4, multiple drug molecules concentrate on the surface of the antibody, forming a "hydrophobic plaque". Hydrophilic PEG linkers, such as AEEA-AEEA, prevent aggregation through the following methods: ① Hydration layer repulsion: PEG chains bind a large number of water molecules, and each EO unit binds 2-3 H ₂ O, forming a hydration layer with a thickness of about 0.5-1 nm/unit. The total thickness of the hydration layer contributed by two AEEA units (four EO) is about 2 nm, which is sufficient to form an effective barrier between drug molecules (repulsive energy~3-5 kT, far greater than hydrophobic attraction~1-2 kT). ② Conformal entropy repulsion: The flexible conformation of PEG chains reduces their entropy during compression, generating entropy elastic repulsion and further resisting aggregation. The experiment showed that using AEEA-AEEA ADC (DAR=6) at a concentration of 5 mg/mL, the aggregation rate (SEC-HPLC detection of HMW aggregates) was less than 3%; The control without PEG linker (DAR=4) had aggregates>15%.
กลไกของการชะลอการกวาดล้าง: ตัวรับการกวาดล้างบนเซลล์ Kupffer และเซลล์บุผนังหลอดเลือดไซนูซอยด์ในตับ เช่น โดเมนจำเพาะของแอนติบอดีในการจดจำของตัวรับขยะ SR-B1 และตัวรับ mannose MR การโหลดยาที่ไม่ชอบน้ำบนพื้นผิวของแอนติบอดีจะเผยให้เห็นบริเวณที่ไม่ชอบน้ำ ซึ่งช่วยเพิ่มความสัมพันธ์ในการล้างตัวรับ สายโซ่ PEG ที่ชอบน้ำของ AEEA-AEEA สามารถ 'ปกปิด' บริเวณที่ไม่ชอบน้ำเหล่านี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพ การวิจัยแสดงให้เห็นว่า ADC ที่ใช้ตัวเชื่อมโยง PEG ช่วยลดการดูดซึมของตับได้ 50-60% เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ไม่ใช่ PEG และอัตราการชำระพลาสมาลดลงจาก 12 มล./ชม./กก. เป็น 6 มล./ชม./กก. ครึ่ง-ชีวิตของวงจรขยายจาก 3 วันเป็น 7 วันในรุ่นเมาส์ นอกจากนี้ ความสามารถในการชอบน้ำยังช่วยลดความเสี่ยงในการจับกับแอนติบอดีต่อต้าน PEG อีกด้วย เมื่อความยาว PEG อยู่ในระดับปานกลาง ภูมิคุ้มกันของ AEEA ไดเมอร์จะต่ำกว่า PEG สายยาว เช่น PEG2000 มาก
การทำงานร่วมกันของสูตร: ตัวเชื่อมโยงที่ชอบน้ำยังทำให้การพัฒนาสูตรผสมง่ายขึ้น - โดยคงความเสถียรโดยไม่จำเป็นต้องใช้สารลดแรงตึงผิวที่มีความเข้มข้นสูง ในสูตรผสมแบบแห้ง- การรวมกลุ่มของ ADC ที่มี AEEA-AEEA หลังการสร้างใหม่น้อยกว่า 1% ซึ่งเกินกว่ามาตรฐานเภสัชตำรับอย่างมาก (<5%). Therefore, hydrophilic PEG linkers have become a "standard" design element for ADC stability and long cycling.